皮革防霉劑防霉效果的評價一般包括2個方面,一方面是防霉劑效力的檢測,其主要目的是確定藥物對霉菌有無抑制或殺滅的能力,常用的評價方法有:抑菌圈法、平板傾注法、點菌法、稀釋培養(yǎng)法、擴散法、最低抑菌濃度(ＭＩＣ)的測定等;另一方面是皮革添加防霉劑后防霉效力的檢測,常用的實驗室評價方法有:抑菌圈法、自然暴露法、濕室懸掛法、土壤埋沒法、培養(yǎng)基法等。
目前,被制革工作者經(jīng)常使用的實驗室評價方法有以下幾種?！ ?/p>
(1)抑菌圈法
用圓紙片或圓皮片(一般直徑為2～4ｃｍ),在一定濃度的防霉劑溶液中浸漬或轉(zhuǎn)動處理一段時間后,將其貼附在涂布一定量的霉菌孢子懸浮液的培養(yǎng)基平板中央,然后在溫度為(28±1)℃,相對濕度≥95%的環(huán)境中培養(yǎng)一段時間,觀察圓紙片或圓皮片周圍透明的抑菌圈的有無,或用游標(biāo)卡尺測量抑菌圈的直徑。抑菌圈法僅是一種定性或半定量的方法,而抑菌圈的大小受防霉劑在瓊脂平板上的擴散能力(與防霉劑的性質(zhì)、防霉劑溶解防霉劑的溶劑的種類、培養(yǎng)基的組成、防霉劑在皮中的分布情況、培養(yǎng)條件都有關(guān))的影響很大,因而參考作用有限。不過,這種方法也有操作簡便、肉眼可辨認、直觀性好等優(yōu)點,常用于防霉劑防霉效果的初步評價。
(2)最低抑菌濃度(ＭＩＣ)法
將供試驗的防霉劑配制成一系列濃度,然后以無菌操作取出1ｍＬ,加入已滅菌的培養(yǎng)皿中,再往各培養(yǎng)皿中注入1ｍＬ供試菌種懸浮液(或者是用接種環(huán)取供試菌種懸浮液劃線接種于加入了防霉劑,且凝固的瓊脂培養(yǎng)基平板上),最后往各培養(yǎng)皿中注入定量的40℃融化的瓊脂培養(yǎng)基,均勻混合、凝團后,將其置于溫度為(28±1)℃,相對濕度≥95%的環(huán)境中培養(yǎng)一段時間(一般為3～5ｄ),檢查與比較能被藥劑全部抑制供試菌種的最低濃度。ＭＩＣ法是一種定量方法,它能較好地反應(yīng)出防霉劑毒力的大小,便于不同防霉劑之間防霉效果的比較,是目前最常用的毒力表達方式之一。但是,影響ＭＩＣ值的因素很多,如供試菌種的來源、接種量、霉菌孢子懸浮液中霉菌孢子的個數(shù)、培養(yǎng)基、溶解防霉劑的溶劑種類、培養(yǎng)條件等,因此,比較不同防霉劑的ＭＩＣ時,應(yīng)在相同的條件下進行。
(3)濕室懸掛法
將經(jīng)防霉劑處理后的皮塊(一般為2.5ｃｍ×5.0ｃｍ的長方塊),用噴霧器將供試霉菌孢子懸浮液噴灑在皮塊的表面,然后將其懸掛在恒溫恒濕箱中〔溫度為(28±1)℃,相對濕度≥95%〕培養(yǎng)28ｄ,并定期觀察其霉變情況,由皮塊的長霉情況來判斷防霉劑的防霉效果
。 供試的菌種一般為黑曲霉、黃曲霉、桔青霉、頂青霉和木霉。這種測定方法是模擬自然環(huán)境的加速試驗,試樣防霉力達到0級或1級為合格,其它為不合格。以上這些方法各有優(yōu)缺點,對同一種防霉劑,使用不同的評價方法,結(jié)果也許不大一樣,即使是使用同一種方法,由于時間、地點和測試者等條件的不同,其結(jié)果也會有差異。因此,這些實驗室的加速試驗方法,只具有一定的參考價值,防霉劑真正的應(yīng)用性能,還必須通過實際的應(yīng)用來檢驗。
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